一、實驗性結(jié)腸炎動物模型實驗準備
1、實驗動物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每組至少8-10只小鼠。
2、造模試劑:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。
3、DSS濃度:急性期模型通常為3-5%,慢性期模型通常為1-3%;可根據(jù)實驗需求及動物類型摸索濃度。該濃度為質(zhì)量體積比,使用飲用水配置后,過濾除菌。
二、實驗性結(jié)腸炎動物模型模型構(gòu)建
慢性與急性結(jié)腸炎模型的構(gòu)建時間分別為:8天與50天,使用DSS濃度為3-5%和1-3%,之后脫頸,取腸道組織,進行相應病理染色。
三、如何評價造模是否成功
1、疾病活躍指數(shù)評分:
從三個方面進行評估打分,分別為體重、糞便粘稠度、糞便潛血等指標。
2、組織學變化評分:
- 潰瘍形成個數(shù);
- 上皮細胞變化;
- 炎癥浸潤;
- 淋巴結(jié)形成:組織學分析的標準方法為HE染色。
3、結(jié)腸長度:
急性結(jié)腸炎模型中,笛8天可檢測到結(jié)腸長度縮短:慢性結(jié)腸光模型中,結(jié)腸長度縮短更加明顯