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麥胚凝集素染色技術服務

簡要描述：麥胚凝集素(WGA)是從谷物中提取出來，可以特異性的結合心肌細胞膜上的一種糖蛋白，二者結合起來可以將心肌細胞膜染出來。WGA可以把心肌細胞膜染出來，這樣是否肥大的細胞,從圖像與正常組的對比就可以看出，也可以用專門的軟件對染出的細胞進行直徑，面積等的測是，能夠分析心肌細胞是否肥大。

  • 更新時間：2026-03-21
  • 廠商性質：代理商
  • 訪  問  量：1081

詳細介紹

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原理與標記類型

  1. 分子基礎：WGA 為 36 kDa 左右的植物凝集素，有雙糖結合位點；未透化時主要標記細胞膜外糖基，透化后可標記高爾基體等細胞內糖基化結構；琥珀?；?WGA 可增強對 β-GlcNAc 的選擇性。

  2. 熒光 WGA 染色（常用）：直接偶聯 FITC、Alexa Fluor 系列，熒光顯微鏡 / 共聚焦觀察，適合活細胞、快速定位；

  3. 酶標 WGA 染色：偶聯 HRP/AP，DAB/BCIP-NBT 顯色，普通光鏡可見、可保存；

  4. 生wu素化 WGA + 鏈霉親和素系統：信號放大，適合低表達樣本。

標準操作流程

  1. 樣本準備

    • 活細胞：PBS 輕洗，勿透化；

    • 石蠟切片：脫蠟→水化→3% H?O?阻斷內源性酶；

    • 冰凍切片：固定（4% 多聚甲醛）后 PBS 洗。

  2. 封閉與孵育：1% BSA 封閉 15–30 分鐘；熒光 WGA 工作液（5 μg/mL 左右，PBS 配制）室溫避光 10–20 分鐘（活細胞 37℃）；

  3. 洗滌：PBS 3 次 ×5 分鐘，徹di去除未結合 WGA；

  4. 復染與封片：DAPI 染核，抗淬滅封片劑封片；酶法需加底物顯色后脫水透明封片。

關鍵注意點與優(yōu)化

  • 透化禁忌：純細胞膜標記嚴禁先透化（Triton X-100 會讓 WGA 進入胞內）；需同時染核 / 胞內蛋白時，優(yōu)先染 WGA 再短暫低濃度透化；

  • 濃度與時間：過高濃度或過長孵育會導致非特異背景；建議做 1、5、10 μg/mL 濃度梯度；

  • 對照：設置同型糖（0.2 M GlcNAc）競爭抑制對照，驗證特異性；

  • 毒性：活細胞染色后及時洗滌，避免 WGA 長時間作用影響細胞活力。


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