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免疫共沉淀技術(shù)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述:免疫共沉淀:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學(xué)原理來(lái)研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法,它可以確定兩種蛋白在完整細(xì)
胞內(nèi)生理?xiàng)l件下是否存在相互作用。

  • 更新時(shí)間:2026-03-20
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詳細(xì)介紹

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免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)步驟:

1.試劑準(zhǔn)備,樣品收集

2.免疫沉淀反應(yīng)后,在進(jìn)行電泳

3.通過(guò)免疫共沉淀確定結(jié)合蛋白


免疫共沉淀:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學(xué)原理來(lái)研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法,它可以確定兩種蛋白在完整細(xì)

胞內(nèi)生理?xiàng)l件下是否存在相互作用。

一、原理

在非變性條件下裂解細(xì)胞,利用抗體將目標(biāo)蛋白特異性沉淀,與其相互結(jié)合的蛋白會(huì)被共同拉下,再用 Western blot 檢測(cè),證明蛋白 - 蛋白相互作用。

二、簡(jiǎn)要步驟

  1. 細(xì)胞用溫和非變性裂解液裂解,離心取上清

  2. 加入Protein A/G 磁珠預(yù)清除非特異性結(jié)合

  3. 加入目標(biāo)蛋白一抗或 IgG 對(duì)照,4℃ 孵育過(guò)夜

  4. 加入 Protein A/G 磁珠,4℃ 結(jié)合 2–4 h

  5. 洗滌磁珠,去除雜蛋白

  6. 煮沸洗脫,進(jìn)行 Western blot 檢測(cè)互作蛋白


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