軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述：軟瓊脂克隆:克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。

更新時(shí)間：2026-03-20
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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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實(shí)驗(yàn)步驟

1.獲取樣本，培養(yǎng)細(xì)胞，

2.調(diào)整細(xì)胞懸液密度為1x103個(gè)/ml細(xì)胞。

3.制備底層瓊脂,溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液以1:9比例在 40℃均勻混合，加入培養(yǎng)血(直徑 60mm )中，每皿含0.5%瓊脂培養(yǎng)基2ml，室溫下瓊脂凝固。

4.制備上層瓊脂37℃密度每川含200個(gè)的細(xì)胞暴液15ml移入小燒杯中，加入 40℃，5%瓊脂等體積混勻，即成025%半盾體瓊脂培養(yǎng)其，配好的半固體瓊脂培養(yǎng)其立即加入鋪有底層瓊脂的培養(yǎng)川中，室溫下瓊脂釋固。 37℃、5%CO2靜詈培養(yǎng)2-3周。

5.當(dāng)培養(yǎng)川中出現(xiàn)肉眼可見克降時(shí),終止培養(yǎng),棄去培養(yǎng)液，PBS液小心浸洗2次，空氣干燥，電酶固定15分鐘，車用醇后空氣干燥，用Giemsa染液染色10分鐘，流水緩惕洗去染液，空氣干燥。

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