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磁珠分選細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述：MACS分選是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合，在外加磁場(chǎng)中通過(guò)抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在分選柱內(nèi)，而無(wú)該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合而沒(méi)有磁性，不在分選柱內(nèi)停留，進(jìn)而使細(xì)胞得以分離。分為有柱式分選和無(wú)柱式分選。

  • 更新時(shí)間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
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詳細(xì)介紹

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（1）有柱式分選-陽(yáng)性分選（磁珠標(biāo)記的細(xì)胞為目的細(xì)胞）

①  磁珠標(biāo)記：樣品與磁珠孵育15min左右；

②  陰性組分先行流出：孵育后的樣品過(guò)柱處理，標(biāo)記磁珠的細(xì)胞在磁場(chǎng)的作用下吸附到MACS分選柱子上，沒(méi)有被標(biāo)記的細(xì)胞（陰性組分）先行流到試管中；

③ 洗脫陽(yáng)性組分：把MACS分選柱子從磁分選器上拿下來(lái)，這時(shí)磁珠是沒(méi)有磁力的，故洗脫獲得陽(yáng)性組分，收集后用于做后續(xù)實(shí)驗(yàn)。


一、基本原理

  • 用特異性抗體標(biāo)記磁珠結(jié)合目標(biāo)細(xì)胞

  • 通過(guò)磁場(chǎng)分離：標(biāo)記細(xì)胞被吸附在管壁，未標(biāo)記細(xì)胞流出

  • 兩種策略：

    1. 陽(yáng)性分選：直接選目標(biāo)細(xì)胞（純度高）

    2. 陰性分選：去除雜細(xì)胞，保留目標(biāo)（活性更好）

二、常用樣本類(lèi)型

  • 小鼠脾臟、淋巴結(jié)、胸腺

  • 外周血（PBMC）

  • 骨髓

  • 肺 / 腦 / 腫瘤組織單細(xì)胞懸液

三、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)步驟（通用版）

1. 制備單細(xì)胞懸液

  • 組zhi剪碎 → 研磨 / 濾網(wǎng)過(guò)濾 → 離心

  • 紅細(xì)胞裂解（脾臟 / 血樣本必須）

  • 重懸于分選緩沖液（PBS+0.5%BSA+2mMEDTA）

  • 計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度

2. 磁珠標(biāo)記

  • 取 10? 細(xì)胞，離心棄上清

  • 加入磁珠抗體，4℃ 避光孵育 15–20 min

  • 每 1–2 mL 緩沖液洗滌，離心去未結(jié)合磁珠

3. 磁場(chǎng)分選

  • 細(xì)胞重懸后加入分選柱 / 分選管

  • 置于磁力架上

  • 收集流出液（陰性組分）

  • 移出磁力架，用緩沖液沖洗，收集洗脫液（陽(yáng)性組分）

4. 質(zhì)控與后續(xù)實(shí)驗(yàn)

  • 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)純度

  • 臺(tái)盼藍(lán)測(cè)活率

  • 可直接用于：培養(yǎng)、刺激、WB、qPCR、測(cè)序等



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