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免疫沉淀實驗服務

簡要描述：免疫沉淀實驗服務是一種純化目的蛋白質(zhì)，及抗原或抗體定性檢測的常用方法。其基本原理基于“抗原-抗體"免疫反應，在蛋白提取液中加入某抗原特異的抗體，形成“抗原-抗體"的免疫復合物后，再與和免疫球蛋白(抗體)有高親和性的Protein A/G beads孵育，純化免疫復合物。

  • 更新時間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
  • 訪  問  量：1958

詳細介紹

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一、定義

Immunoprecipitation，IP
用特異性抗體將細胞內(nèi)某個目標蛋白從總蛋白中 “抓取" 并富集出來，用于后續(xù)檢測。
和 Co-IP 區(qū)別：

  • IP：富集單個目標蛋白

  • Co-IP：富集蛋白復合物，檢測相互作用

二、主要用途

  • 富集低豐度蛋白，方便 Western blot 檢測

  • 檢測蛋白磷酸化、泛素化、乙?；?/span>等修飾

  • 純化蛋白用于質(zhì)譜、酶活實驗

  • 驗證抗體特異性

三、實驗流程（標準）

  1. 細胞裂解

    非變性 / 溫和變性裂解液，加蛋白酶 / 磷酸酶抑制劑

  2. 預清除

    加 Protein A/G 磁珠，減少非特異結合

  3. 免疫沉淀

    加目標蛋白一抗，4℃ 孵育過夜

  4. 結合磁珠

    加 Protein A/G 磁珠，4℃ 結合 2–4 h

  5. 洗滌

    洗 3–4 次，去除雜蛋白

  6. 洗脫

    上樣緩沖液煮沸，做 Western blot 或質(zhì)譜


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